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密理博超濾管如何使用？使用過程又需要注意哪些事項？
更新時間：2023-06-28 瀏覽次數(shù)：552
密理博超濾管具有快速超濾功能，能夠達到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理，獲得較高樣本回收率（通常>90%），并達到30倍的濃縮。
根據(jù)標稱分子量限值(NMWL)的不同，典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢；死體積設(shè)計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后，濃縮樣本（截留部分）可通過一個簡便的倒置（上下反轉(zhuǎn)）離心步驟而實現(xiàn)高效回收。超濾管未經(jīng)消毒，僅供一次使用。
密理博超濾管的應(yīng)用：
1.濃縮或純化生物樣本。
2.純化組織培養(yǎng)提取液或細胞裂解液中的大分子成分，去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標記，在HPLC前去除蛋白質(zhì)。
3.除鹽，緩沖液更換，或滲濾。
密理博超濾管使用：
1.預(yù)處理：新超濾管：使用前用純水浸泡，冰箱預(yù)冷10min。然后將水倒出，置于冰上預(yù)冷2-5min，加樣；
舊超濾管：倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液，用純水沖洗干凈10遍(注意水流速盡量平緩，防止沖破濾膜)，置于冰上預(yù)冷2-5min，加樣。
2.加樣：如超濾管中有少許殘留水可將內(nèi)管倒置1000×g離心1min，移液槍移取適量樣本加入超濾管中。
3.離心：配平，12000×g離心（15-30min），等達到目的轉(zhuǎn)速后方可離開。
4.樣本收集：外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清，如需取濃縮后樣本用于其他實驗，則另取外管，內(nèi)管倒置，1000×g離心1-2min。
5.清洗：使用完的超濾管用純水反復(fù)清洗5次，再用75%乙醇沖洗3次。
注意事項：
1.其最大離心力不能超過12000g，否則會導(dǎo)致濾膜破損；
2.超濾樣本會損失五分之一至二分之一的樣本量，主要取決于樣本中蛋白含量；
3.若管底有可見的蛋白沉淀，可以先加入純水，然后用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀懸起，然后倒掉，不可用自來水猛沖；
4.內(nèi)管不能用烘箱進行烘干。